用于辣椒粉中蘇丹紅檢測的分子印跡固相萃取方法 （分子印跡專用柱)

蘇丹紅又名蘇丹(Sudan)，是一種化工染色劑，主要用于油彩、機(jī)油、蠟和鞋油等產(chǎn)品的染色。用蘇丹紅染色后的食品顏色鮮艷且不易褪色，能夠引起人們強(qiáng)烈的食欲，所以很多不法商販將蘇丹紅添加到食品當(dāng)中。

蘇丹紅被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)劃分為潛在遺傳毒性物質(zhì)和致癌物質(zhì)，它們的降解產(chǎn)物也被認(rèn)為具有致癌性。因此，歐盟(EU)委員會決議強(qiáng)制要求對辣椒粉以及含有辣椒粉的產(chǎn)品進(jìn)行蘇丹紅檢測，包括蘇丹紅 I 號、 II 號、 III 號和 IV號 。

實驗部分

一、實驗?zāi)康?/h4>

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測辣椒粉中蘇丹紅的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗?zāi)繕?biāo)物;

蘇丹紅I(CAS:842-07-9)、蘇丹紅II(CAS:3118-97-6)、蘇丹紅III(CAS:85-86-9)、蘇丹紅IV(CAS:85-83-6)

三、適用范圍

本方法適用于辣椒粉中蘇丹紅檢測的HPLC檢測及確證。

四、實驗材料

蘇丹紅分子印跡專用柱

五、實驗方法

1、樣品提取

準(zhǔn)確稱取辣椒粉0.5 g于15 mL離心管中，加入5 mL正己烷，渦旋混合1 min，超聲5 min，3000 r/min離心5min，取上清液；上述步驟重復(fù)提取4次，合并所有上清液，于40 ℃下氮吹濃縮至約4 mL，待凈化。

2、SPE凈化

(1)活化：蘇丹紅固相萃取柱使用前用5 mL正己烷活化。

(2)上樣和洗脫：往固相萃取柱中加入待凈化液；再加入5 mL正己烷淋洗，棄去流出液，再加5 mL乙酸乙酯進(jìn)行洗脫，收洗脫液。

(3)重新溶解：洗脫液40℃氮吹近干，1 mL乙腈定容，渦旋1 min，經(jīng)濾膜過濾供HPLC測試。

3、HPLC條件

設(shè)備：Waters Alliance 2695

色譜柱：CommaSep® ODS  (4.6 mm×150 mm, 5 μm)

檢測器：Waters 2487 紫外檢測器

波長：478 nm

梯度洗脫：A：乙腈  B：0.1 %甲酸水溶液

六、實驗結(jié)果

1、5 .0 mg/kg辣椒粉中蘇丹紅的添加回收結(jié)果

2、添加水平為5.0 mg/kg蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)液相色譜圖

圖1  添加水平為 5.0 mg/kg蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)液相色譜圖