228多功能固相凈化柱
發(fā)布時(shí)間：2022/02/10
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參考標(biāo)準(zhǔn)
?GB 5009.185-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測(cè)定
試劑配制
?乙酸溶液:取10mL乙酸加入250mL水,混勻。
?果膠酶(液體):活性 ≥1500U / g , 2℃~8℃ 避光保存。(P/N: Clover 228-01)
樣品提取
?液體試樣(蘋(píng)果汁、山楂汁等)
稱取4g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,加入21mL乙腈,混合均勻,在6000r/min下離心5min,待凈化。
?固體、半流體試樣(山楂片、果丹皮、蘋(píng)果果泥、蘋(píng)果果醬、帶果粒果汁等)
稱取1g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,再加入10mL水與150μL果膠酶溶液混勻,室溫下避光放置過(guò)夜后,加入10.0mL乙酸乙酯,渦旋 混合5min,在6000r/min下離心5min,移取乙酸乙酯層至梨形燒瓶。再用10.0mL乙酸乙酯提取一次,合并兩次乙酸乙酯提取液,在40℃水浴中用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干,以2.0mL乙酸溶液溶解殘留物, 再加入8mL乙腈,混勻后待凈化。
樣品凈化
將提取液通過(guò)凈化柱凈化,棄去初始的1mL凈化液,收集后續(xù)部分。用吸量管準(zhǔn)確吸取5.0mL凈化液,加入20μL乙酸,在40℃下用氮?dú)饩従彽卮抵两?加入乙酸溶液定容至1mL,渦旋30s溶解殘?jiān)?過(guò)0.22μm 濾膜,收集濾液于進(jìn)樣瓶中以備進(jìn)樣。
液相色譜條件
?色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）
?流動(dòng)相：乙腈-水（5+95，v/v）或甲醇-水（10+90，v/v）
?流速：0.8mL/min
?檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)276nm
?進(jìn)樣體積：20~100uL
?柱溫：40℃
?色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）
?流動(dòng)相：乙腈-水（5+95，v/v）或甲醇-水（10+90，v/v）
?流速：0.8mL/min
?檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)276nm
?進(jìn)樣體積：20~100uL
?柱溫：40℃
