魚肉中孔雀石綠的檢測-分子印跡固相萃取

孔雀石綠(Malachite green，MG）屬于三苯甲烷類染料，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)上，常作為殺菌劑用于預(yù)防和治療各類水產(chǎn)生物，如魚卵和魚體中的鰓霉病，水霉病等?？兹甘G具有高毒性、高殘留、高致癌、致突變等危害，被指定為水生生物禁用藥物。我國已宣布了嚴(yán)禁在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用孔雀石綠，并規(guī)定其不得檢出。

一、樣品提取

魚去鱗、皮，沿背脊取肌肉，粉碎均勻后，取魚肉試樣2 g(精確至0.01 g)，加入2 g NaCl，再加入 15 mL 70%乙腈水，渦旋震蕩10 min，超聲提取10 min，以10000 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min，移取全部上清液至離心管中；將所得的上清液中加入等體積的去離子水，混勻，作為待凈化液。

二、樣品凈化

活化：依次用3.0 mL乙腈和3.0 mL去離子水平衡MISPE柱；

上樣和淋洗：移取所得樣品提取液過柱，再用3.0 mL的水淋洗，棄去淋洗液；

洗脫：用3.0 mL甲醇-乙酸（9:1，V/V）洗脫，收集洗脫液；

重新溶解：洗脫液經(jīng)氮吹濃縮至近干，用1.0 mL 乙腈溶解，過0.45 μm有機(jī)濾膜，進(jìn)行上機(jī)測定。

注：整個(gè)過程控制流速不要超過1 mL/min。

三、 、儀器條件

液相色譜條件

儀器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific）

色譜柱：Agilent C18 (4.6 mm×250 mm，5μm)

流動相：乙腈：50mM乙酸銨(0.1%乙酸)=60:40

檢測波長：620 nm

流速：1.2 mL/min

柱溫：30 ℃

進(jìn)樣量：20 μL

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果